[Molecular cloning, in vitro expression and bioactivity of TRAIL (TNFSF10) gene from finless porpoises].

: 构建可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL) 基因的表达体系，研究其蛋白表达产物对肿瘤细胞凋亡的影响，为以后江豚免疫系统的研究奠定基础。通过RT-PCR 技术从江豚Neophocaena phoconoides血液总RNA 中反转录扩增出肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (简称fTRAIL) 的全长cDNA 序列，并将fTRAIL的胞外可溶性 (简称fsTRAIL) 片段连接入表达载体pET43.1a 中，在大肠杆菌BL21 (DE3) 中表达并纯化，Western blotting 对产物Nus-His-fsTRAIL 蛋白进行鉴定。体外用MTT 法、台盼蓝拒染法及流式细胞术检测Nus-His-fsTRAIL 蛋白对Jurkat 细胞和HeLa 细胞的影响。成功构建了fTRAIL 胞外可溶性片段 (简称fsTRAIL)与pET43.1a 组成的表达载体，并获得Nus-His-fsTRAIL 蛋白。体外实验表明，Nus-His-fsTRAIL 蛋白能够以剂量依赖的方式抑制Jurkat 和HeLa 细胞的增殖并诱导其凋亡。Nus-His-fsTRAIL 表达产物具有对Jurkat 和HeLa细胞体外抗肿瘤活性的作用。.