Análise funcional de microRNAs e fatores de transcrição durante a diferenciação eritroide in vitro em pacientes com talassemia beta intermediária

As talassemias beta sao caracterizadas pela reducao parcial ou completa da sintese de cadeias da globina beta. Estudos mostraram que varios fatores de transcricao estao envolvidos na regulacao da expressao de genes eritroides, incluindo o complexo transcricional de GATA1. Alem disso, os microRNAs podem atuar como reguladores pos-transcricionais durante o desenvolvimento eritroide. Neste trabalho, foram avaliadas as possiveis relacoes dos microRNAs tanto com fatores de transcricao eritroide-especificos quanto com os genes das globinas. Para isso, foi realizada a quantificacao da expressao dos microRNAs e dos fatores de transcricao durante a diferenciacao eritroide in vitro de pacientes com talassemia beta intermediaria. Posteriormente, selecionamos o miR-210-3p para os estudos subsequentes e vetores lentivirais foram utilizados para inibir a expressao desse miR em celulas K562 e KU812. Diminuicao da expressao da globina gama e aumento do nivel de KLF1 foram observados nas celulas inibidas. Analise in silico demonstrou que o miR-210-3p possui dois sitios de ligacao no RNAm de KLF1 e propoem-se que a expressao aumentada de KLF1 possa colaborar para a diminuicao da expressao do gene da globina beta via miR-210-3p. Pela primeira vez e proposto um potencial RNAm alvo para o miR-210-3p que esteja relacionado ao switching da HbF e um possivel mecanismo modulador da expressao dessa molecula. Abstract