HIV-1 CRF07BC毒株gp41NHR结构域N51的表达及结构分析

目的对来源于HIV-1中国流行株CRF07BC的包膜糖蛋白gp41NHR结构域的N51进行表达和结构及抗原性分析。方法运用重叠延伸PCR方法扩增出N51Fd基因，将其插入真核表达载体pFUSE—hIgG1-Fc2，并进行核苷酸序列测定。利用生物信息学软件、圆二色谱法、免疫印迹法对表达的N51FdFc．BC重组蛋白进行结构和抗原性分析。结果成功构建pFUSE／N51Fd．BC表达载体，并在真核表达体系实现了目的蛋白的高效表达。免疫印迹结果显示该重组蛋白大小约为35000，可与抗HIV-1gp41N／C多肽的抗体反应。生物信息学分析显示N51FdFc．BC重组蛋白相对分子质量为34315．1，等电点PI为7．59，且形成了无规则卷曲结构，易于与抗体反应，可作为抗原。圆二色谱的分析与生物信息学软件预测的结果一致。结论N51FdFc—BC重组蛋白具有无规则卷曲结构，可适合作为HIV-1亚单位疫苗的免疫原。