利用VIGS技术研究 NtbHLH93 基因在烟草甾醇代谢中的功能

为进一步研究烟草 NtbHLH93 基因的功能，利用病毒诱导基因沉默（Virus induced gene silence，VIGS）技术降低烟草中 NtbHLH93 基因的表达。通过测定pTRV2- NtbHLH93 烟株中的甾醇含量，发现 NtbHLH93 基因表达下调后，总甾醇、豆甾醇、胆固醇和 β -谷甾醇的含量显著降低。转录组测序发现 NtbHLH93 基因下调后，共有259个基因差异表达。对这些差异表达基因进行KEGG表达通路分析，发现质体萜类代谢2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸（2-C-Methyl-D-Erythritol-4-Phosphate，MEP）途径中有两个基因（ Niben101Scf00063g13014.1 和 Niben101Scf06249g03002.1 ）上调表达，这两个基因与MEP途径中的牻牛儿基牻牛儿基还原酶（Geranylgeranyl diphosphate synthases，GGPPS）基因序列高度相似，推测当甾醇合成代谢通路受阻后导致 Niben101Scf00063g13014.1 和 Niben101Scf06249g03002.1 基因上调表达。