Aislamiento y caracterización de células mesenquimales derivadas de tejido adiposo
2016
Introduccion : Existe un creciente interes cientifico en el potencial terapeutico de las celulas madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo ( ADSCs , en ingles). Estas celulas son abundantes en el tejido adiposo, son de facil obtencion y con un alto potencial de diferenciacion hacia linajes celulares especializados incluyendo adipocitos, osteocitos, condrocitos, miocitos, cardiomiocitos, tenocitos, vasos sanguineos y neuronas. Este trabajo se desarrollo con el objetivo de implementar en el laboratorio un procedimiento para aislar y cultivar ADSCs, con caracteristicas que corresponden a las informadas para este linaje celular. Metodo: los precursores de celulas adiposas humanas se obtuvieron de tejido subcutaneo abdominal. Las celulas se separaron enzimaticamente del tejido y se decantaron por centrifugacion, luego de cultivadas, se caracterizaron en su capacidad de diferenciacion y por su marcadores fenotipicos. Resultados: Las ADSCs aisladas se replicaron en estas condiciones de cultivo y mantuvieron un fenotipo estable durante todo el periodo de estudio. Se comprobo su potencial adipogenico y osteogenico in vitro, como corresponde a las celulas madre mesenquimales. El estudio por citometria de flujo mostro que estas celulas expresanCD73, CD90 y CD105 y son negativas para los marcadores de linaje hematopoyetico CD34 y CD45.En los ensayos de inhibicion in vitro , las ADSCs demostraron su capacidad para inhibir la proliferacion de celulas T humanas. Conclusiones : La caracterizacion fenotipica y funcional de las ADSCs obtenidas a partir del tejido adiposo abdominal demuestra que es posible la obtencion mediante cultivo in vitro de celulas mesenquimales humanas sin inducir diferenciacion espontanea, manteniendo su integridad funcional y altos niveles de proliferacion, lo que sienta las bases para el inicio de ensayos preclinicos y su uso futuro en la terapia celular en nuestro pais.
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