GENERACIÓN DE HIDROGEL A PARTIR DE MATRIZ EXTRACELULAR

Un accidente cerebrovascular (ACV) sucede cuando se detiene repentinamente el flujo de la sangre hacia una parte del cerebro. Las celulas cerebrales necesitan el oxigeno y los nutrientes que se transportan en la sangre, de manera que cuando ocurre el ACV, estas celulas empiezan a morir en unos pocos minutos. La medicina regenerativa expone nuevas estrategias terapeuticas basadas en la ingenieria de tejidos que emplean el cultivo de celulas sobre matrices tridimensionales para desarrollar sustitutos biologicos capaces de restaurar, mantener o mejorar las funciones del tejido cerebral. En este trabajo se pretende la confeccion de hidrogeles biodegradables inyectables de matriz extracelular descelularizada (MECd) cerebral obtenida de cerebro de porcino. Los hidrogeles son estructuras tridimensionales formadas por polimeros reticulados, capaces de absorber gran cantidad de agua y de proporcionar un microambiente acuoso muy similar al de la matriz extracelular. Son porosos, por lo que permiten el paso de nutrientes y de productos de desecho, necesarios para la supervivencia celular. Para la preparacion del hidrogel, primero, la matriz extracelular descelularizada cerebral ha sido congelada y liofilizada, para obtener biomaterial pulverizado. Segundo, se somete a digestion enzimatica usando tripsina a una concentracion de 1mg/mL en PBS en constante agitacion a 37oC durante 2 dias. Tercero, se congela la muestra a -80oC. Cuarto, se adiciona una proporcion 1/10 de NaOH y 9/10 de PBS para neutralizar la accion enzimatica. Y finalmente, el biomaterial se incuba a 37 oC hasta que se logra la formacion de un hidrogel. El enfoque futuro, es la caracterizacion del hidrogel en terminos biologicos y fisicoquimicos. Esperamos que este producto pueda servir como sustrato o andamio para la adhesion y diferenciacion de celulas a linajes neuronales tanto in vitro, como in vivo.