Influence de l'organisation tridimensionnelle des cellules de lymphome folliculaire sur l'expression génique : contribution à la caractérisation des mécanismes d'échappement immunitaire et de chimiorésistance

Les lymphomes malins non-Hodgkiniens (LMNH) representent la pathologie la plus frequente en hemato-oncologie. Parmi eux, le lymphome folliculaire (LF) est le second type de LMNH en frequence. Les cellules de LF derivent du centre germinatif et sont caracterisees par la surexpression du proto-oncogene BCL2, induite par la translocation chromosomique t(14;18). Dans les carcinomes, il est largement demontre que l'organisation tridimensionnelle joue un role essentiel dans la modulation de parametres biologiques tels que la croissance tumorale, la signalisation intracellulaire, mais egalement la survie cellulaire, la reponse aux drogues, ou encore le potentiel metastatique. Paradoxalement, alors que le LF se developpe chez le malade en 3D, la contribution de l'organisation spatiale sur la biologie des cellules de LF n'a pas ete etudiee. Pour cette raison, nous avons developpe le premier modele de culture de cellules lymphomateuses en 3 dimensions (MALC pour Multicellular Aggregates of Lymphoma Cell) et nous avons etudie dans ce modele, en comparaison avec la culture conventionnelle en suspension, l'expression genique, la proliferation, la reponse au stress, et la sensibilite aux agents genotoxiques, aux therapeutiques ciblees et aux effecteurs de l'immunite naturelle. Nous montrons que l'organisation spatiale modifie considerablement le transcriptome (plus de 600 genes sont ainsi modifies), avec des signatures caracterisant la regulation negative de la proliferation, le stress hypoxique et l'activation de la voie NFkB. Ces trois signatures se rapprochent de celles observees dans les echantillons tumoraux de patients. Les analyses phenotypiques confirment le ralentissement global de la proliferation et pour la moitie des cellules, l'entree en quiescence. Ce phenomene est regule par HIF?. Les cellules cultivees en 3D sont plus resistantes aux anthracyclines et aux agents alkylants ainsi qu'aux cellules NK. Ces memes cellules restent par contre sensibles aux therapies ciblees (rituximab et inhibiteur de la voie mTOR). Au total, ce travail montre que la structuration 3D des cellules de LF modifie considerablement la biologie de ces cellules, suggerant ainsi que le modele MALC offre des opportunites uniques pour le criblage pre-clinique de nouvelles molecules