Study on effect of echinococcus granulosus protoscolices on fibrosis of bone marrow mesenchymal stem cells

Objective: To investigate the effect of echinococcus granulosus protoscolices on the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) into fibroblasts. 方法: 取 4 周龄 C57BL/6 小鼠股骨骨髓，利用贴壁培养法分离培养 BMSCs；从感染细粒棘球蚴的羊肝中提取细粒棘球绦虫原头节。实验分为 2 组，实验组取第 3 代 BMSCs 和细粒棘球绦虫原头节共培养，对照组为单纯第 3 代 BMSCs。共培养前后倒置显微镜观察 BMSCs 形态；培养 1、3、5、7 d，采用实时荧光定量 PCR 检测两组 BMSCs 中 TGF-β 1、Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原基因表达，Western blot 检测两组 BMSCs 中 TGF-β 1、Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、Smad7 和磷酸化 Smad2/3 蛋白表达，ELISA 检测两组上清中 Ⅰ 型胶原和 Ⅲ 型胶原蛋白含量。. 结果: 细粒棘球绦虫原头节与 BMSCs 共培养 7 d 后观察到 BMSCs 形态发生改变，变成梭形和不规则三角形，更接近单独培养的小鼠成纤维细胞。培养 1、3、5、7 d，实时荧光定量 PCR 检测示，实验组 TGF-β 1、Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原 mRNA 相对表达量均显著高于对照组；Western blot 检测示，实验组 TGF-β 1、Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原、磷酸化 Smad2/3 蛋白相对表达量均显著高于对照组，Smad7 蛋白相对表达量显著低于对照组；ELISA 检测示，实验组上清中 Ⅰ 型胶原和 Ⅲ 型胶原蛋白含量均显著高于对照组。上述指标两组间比较差异均有统计学意义（ P<0.05）。. 结论: 细粒棘球绦虫原头节可能通过 TGF-β 1/Smad 信号通路，促进 BMSCs 分泌 Ⅰ 型胶原、Ⅲ 型胶原和 TGF-β 1，进而促进 BMSCs 纤维化。.