Expression des récepteurs de chimiokines par la cellule musculaire lisse bronchique : rôles dans l'activation cellulaire et l'infection par le virus respiratoire Syncytial

L' @asthme est une affection des voies respiratoires caracterisee par l’association d’une broncho-constriction et un remodelage bronchique. Les crises d’asthme repetees entrainent un epaississement permanent des couches musculaires lisses de la paroi des voies respiratoires. La demonstration de la contraction des cellules musculaires lisses bronchiques (CMLB) en presence de l’histamine, des eicosanoides et des cytokines proinflammatoires, renforce le concept de cellules cibles dans l’asthme. Cependant, des recherches recentes ont suggere egalement une participation de ces cellules dans certaines les etapes de la reponse allergique grâce a leur production de plusieurs mediateurs, notamment les cytokines de types Th1 et Th2 et les chimiokines. Des travaux menes dans notre laboratoire ont montre que les CMLB pourraient exprimer certains recepteurs de chimiokines (notamment le CCR3). L’ensemble de ces donnees nous ont permis d’orienter nos recherches vers l’analyse de l’expression d’autres recepteurs par ces cellules. Les experiences de RT-PCR quantitative et de cytometrie en flux nous ont permis de montrer que les CMLB expriment les recepteurs de chimiokines CCR2, CCR4 et CCR5. De plus, l’activation des ces recepteurs par les chimiokines (MCP1, MDC et MIP-1β) induit une mobilisation de calcium intracellulaire et un chimiotactisme des CMLB. La stimulation de ces cellules par les cytokines pro-inflammatoires (TNF-α et IL1-β) regule l’expression des CCR4 et CCR5 et ne semble pas avoir d’effet sur celle de CCR2. Ces travaux suggerent un role potentiel de certains recepteurs de chimiokines dans le remodelage bronchique constate chez les patients asthmatiques. Bien que le virus respiratoire syncytial (VRS) soit la cause principale de l’infection des voies respiratoires inferieures chez les enfants, l’effet de ce pathogene sur les CMLB n’a pas ete suffisamment etudiee. Ainsi, nous avons emis l’hypothese de la possibilite de l’infection des CMLB par le VRS. L’influence du VRS sur la liberation de differents mediateurs par les CMLB a ete determinee par des experiences de RT-PCR et d’ELISA. Nos resultats demontrent que les CMLB sont sensibles a l'infection par le VRS in vitro et ne manifestent pas d’effet cytopathique comparable a celui habituellement observe sur les cellules epitheliales bronchiques. Nous avons montre egalement que, suite a l’infection des CMLB par le VRS, l'expression des cytokines pro-inflammatoires TNFα, IL-1β et l'IL6 est augmentee de facon significative. Une forte expression de l'IL-8 est constatee notamment 48h post-infection, tant au niveau ARNm qu’au niveau proteique. De plus, les experiences de chimiotactisme des neutrophiles en chambre de Boyden en reponse aux surnageants des CMLB infectees par le VRS ont montre une migration cellulaire. L’ensemble de ces resultats suggerent que les CMLB pourraient etre des cellules hotes du VRS et jouer un role dans la reponse immunitaire en secretant des mediateurs inflammatoires souvent presents en grande quantite dans les muqueuses bronchiques et les LBA de patients asthmatiques ou ayant une exacerbation viro-induite par le VRS.