基于质粒表达的siRNA对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的抑制作用

2011 
猪圆环病毒2型(PCV2)是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的必要病原,对养猪生产构成了严重威胁,但当前缺乏有效的防治手段。为了探索治疗PCVAD的新途径,分别针对PCV2的病毒复制相关蛋白基因(rep)与衣壳蛋白基因(cap),构建了PCV2特异的siRNA表达质粒(pGensil-R259、pGensil-C297和pGensil-C490)和PCV2非特异的阴性对照质粒(pGensil-SCR)。在脂质体介导下,将构建的siRNA表达质粒与阴性对照质粒转染PK-15细胞,转染质粒20h后感染PCV2。结果质粒表达的特异siRNA抑制了PCV2DNA的合成及Rep和Cap蛋白的表达,使病毒滴度(TCID50)显著下降;针对靶基因不同位点的siRNA的抑制效果不同,病毒感染后36h内,siRNA对PCV2的抑制作用最强,随后有所下降,但直至感染后60h仍然能够显著抑制PCV2复制。实验结果提示质粒表达的特异siRNA能够显著地抑制PCV2的增殖,但这种抑制功能与作用时间呈负相关。
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