In vitro and in vivo cell surface expression of a thiol-specific antioxidant-like protein in Candida albicans

2005 
Objectif. - Les proteines hyphales hydrophobes de surface comptent parmi les facteurs de virulence potentiels de Candida albicans. Methodes. - Ainsi, une banque d'ADNc a ete construite a partir d'ARNm de tubes germinatifs, et immunocriblee avec un immunserum de lapin dirige contre les proteines hyphales hydrophobes purifiees. Resultats. - L'analyse de la sequence nucleotidique et de la sequence d'acides amines deduite de l'un des clones selectionne a revele un cadre ouvert de lecture codant une proteine de 196 acides amines ayant une masse moleculaire de 25 kDa. Une homologie significative de cette sequence a ete montree avec les sequences d'une classe d'enzymes antioxydantes, thiol-specifiques, presentes chez les procaryotes et les eucaryotes. Une identite de 73% a ete obtenue avec la proteine Tsa1 de Saccharomyces cerevisiae. La RT-PCR quantitative a montre l'expression du gene TSA-like de C. albicans a la fois pour la forme blastospore et pour la forme tube germinatif, avec une sur-expression de 15 fois pour ces tubes germinatifs. Des etudes complementaires in vitro, utilisant des anticorps anti-peptides et la microscopie confocale, ont demontre la presence de la proteine correspondante exclusivement a la surface de la partie hyphale des tubes germinatifs. Conclusion. - En conclusion, nous avons revele que cette proteine Tsa-like de C. albicans etait synthetisee a la fois par les blastospores et les tubes germinatifs et qu'elle etait exprimee a la surface des formes invasives in vitro, mais aussi in vivo dans un modele murin. Elle pourrait donc jouer un role dans la pathogenicite de C. albicans.
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