瘦素通过下调 FBP 1基因表达促进人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞增殖并抑制细胞凋亡

2017 
目的探讨瘦素(leptin)对人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的分子作用机制。 方法应用瘦素(200 ng/mL)处理人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞后,分别采用CCK-8法和FCM法检测BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖及凋亡能力;蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白c-Myc和cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测经瘦素(200 ng/mL)处理后,BT-474和MDA-MB-231细胞内果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1)mRNA和蛋白表达水平的变化。然后,采用脂质体转染法,将携带有 FBP 1基因的重组质粒分别转染至BT-474和MDA-MB-231细胞中,随后行瘦素(200 ng/mL)处理,再应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FBP1 mRNA及其蛋白的表达水平,以验证 FBP 1基因过表达的效果。采用CCK-8法再次检测BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖能力的变化,蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白c-Myc和cyclin D1表达水平的变化,FCM法检测细胞凋亡率的变化,并采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平的变化。 结果经瘦素(200 ng/mL)处理后,BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖能力明显增强( P 值均 P 值均 P 值均 P 值均 P 值均 P 值均 P 值均 P 值均 < 0.01)。 结论瘦素可促进人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖并抑制2株细胞的凋亡,其机制可能与下调 FBP 1基因表达有关。
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