Analyse du profil cytokinique et électrophysiologique de l’activation de TRPV1, TRPA1 et PAR2 dans un modèle d’explant humain réinnervé

Afin d’etudier le prurit in vitro, nous avons decide de developper un modele d’explant de peau reinnervee par des neurones de rats. Nous avons pu confirmer la presence de nouvelles fibres nerveuses dans l’epiderme a partir de 5 jours. Les principaux acteurs de la demangeaison non-histaminergique (PAR-2, TSLP, TSLP-R, TRPA1, IL31-R, TRPV1) ont ete retrouves. Par ELISA, nous avons montre que la liberation de TSLP ou CGRP dans le surnageant etait module par l’ajout en topic de polygodial, SLIGK ou capsaicine. En qPCR, l’activation par SLIGK a montre une diminution de l’expression du VEGF, le polygodial une augmentation de l’expression de la TSLP, du TNF et du NGF et la capsaicine une diminution de l’expression de la sema3 et du TNF. L’analyse en patch-clamp sur les neurones attache a l’explant a montre l’activation d’1 fibre sur 11 apres depot en topic sur l’epiderme de SLIGKV, 5/5 par le polygodial et 4/6 par la capsaicine. Ce modele peut donc etre utilise pour etudier les mecanismes lies a la demangeaison et l’inflammation neurogene in vitro. L’activation du TRPV1, du TRPA1 et du PAR-2 conduit a un profil de reponse different dans l’explant de peau ou les neurones.