Etude de la dualité d’AIF, dans la mort cellulaire programmée indépendante des caspases via son partenaire yH2AX et dans la phosphorylation oxydative via les complexes et supercomplexes mitochondriaux

L’apoptosis inducing factor (AIF) est une flavoproteine mitochondriale a deux visages, a travers sa fonction vitale dans la phoshorylation oxydative et sa fonction apoptotique lors de la mort cellulaire programmee (MCP). Suite a un stimulus de mort cellulaire, AIF est relarguee de la mitochondrie vers le noyau, et forme un complexe de degradation de l’ADN avec l’histone H2AX et la DNase Cyclophiline A. Ce degradosome est crucial pour l’execution de la MCP independante des caspases aussi appelee necroptose. Ce travail de these determine l’implication de la forme activee d’H2AX par phosphorylation sur la serine 139, γH2AX dans le degradosome lors de la necroptose induite par l’agent alkylant de l’ADN, MNNG. La transduction de fibroblastes embryonnaires murins (MEF) H2AX-/- avec la forme non-phosphorylable ou phosphomimetique d’H2AX pour la serine 139, a permis de demontrer que γH2AX joue un role conformationnel dans l’activation du degradosome et l’execution de la necroptose. De plus, nous avons demontre que les kinases, activees suite aux dommages de l’ADN, ATM et DNA-PK controlent la necroptose via l’activation d’H2AX. D’autre part, nous avons etudie la fonction d’AIF dans la mitochondrie en utilisant un modele de MEF inductible pour la deletion d’AIF. L’analyse de l’activite de la phosphorylation oxydative dans ce systeme in vitro inedit nous a permis de suivre les consequences progressives de la perte d’AIF. Ainsi, nous avons confirme qu’AIF est essentiel pour le fonctionnement de ce mecanisme energetique mitochondrial. Et pour la premiere fois, le role vital de cette proteine mitochondriale n’est pas seulement associe au complexe I mais aussi aux supercomplexes.