Recherche de proteines impliquees dans la mort neuronale par apoptose

Dans le systeme nerveux, la mort cellulaire par apoptose permet d'eliminer les neurones n'ayant pas etabli de contact avec leurs cellules cibles qui leur fourniraient l'apport trophique necessaire a leur survie. Notre travail de these a eu pour but d'identifier des proteines intervenant directement dans l'induction de la mort en recherchant celles surexprimees dans des cellules en train de mourir par apoptose. Nous avons developpe un modele d'etude, constitue par des cultures de neurones derives de ganglions ciliaires d'embryons de poulet de 8 jours. Nous avons montre que la mort de ces neurones presentait les caracteristiques de l'apoptose et que le remplacement des ntf par des inhibiteurs de la transcription ou de la traduction permettait leur survie. Puis nous avons etudie la synthese des proteines au cours de la survie ou de la mort des neurones, par la methode d'electrophorese en deux dimensions apres marquage radioactif a la 35s-methionine. Dans les neurones cultives en l'absence de ntf, cinq proteines au moins sont beaucoup plus fortement exprimees que dans les neurones survivant en presence de ntf. Ces proteines surexprimees semblent etre nucleaires. Nous avons observe que ces 5 proteines etaient egalement surexprimees dans des neurones de ganglions dorsaux en culture prives de ngf et dans des motoneurones de moelle epiniere cultives en l'absence d'extrait musculaire. Trois d'entre elles sont presentent dans des neurones de ganglions dorsaux de rat cultives en absence de ngf et deux dans les thymocytes de rat traites a la dexamethasone. Nous avons microsequence trois d'entre elles qui sont des formes tronquees de l'actine. Ces resultats montrent que la proteolyse de l'actine est un evenement commun a differents types de cellules mourant par apoptose. Le role potentiel de la lyse specifique de l'actine au cours de la mort cellulaire est discute