Importancia de los estudios de biología molecular en el asesoramiento genético de familias argentinas con retinoblastoma

espanolObjetivo: Evaluar la importancia de la deteccion de mutaciones del gen RB1 en el asesoramiento genetico de las familias argentinas con retinoblastoma. Metodos: Se incluyeron en este estudio 34 familias argentinas con Retinoblastoma (Rb) bilateral y unilateral. Se analizaron 130 muestras de ADN de leucocitos, tumores y vellosidades corionicas, por ensayos de Biologia Molecular indirectos y directos, como Southern blot, segregacion de los polimorfismos BamHI, Rbi4, XbaI y Rb 1.20 (PCR-RFLP, PCR-STR), PCR-heteroduplex y secuenciacion del gen RB1. Resultados: El analisis molecular fue informativo en 18 familias de las 34 incluidas en el estudio (53%), el 56% con Rb bilateral y el 44% con Rb unilateral. Se conto con muestras de ADN tumoral de 11 pacientes que se estudiaron para detectar perdida de heterocigosidad (LOH), que posibilito identificar el alelo RB1 mutado en 9 pacientes (82%). Cuando no se analizaron las muestras tumorales, los estudios fueron informativos solo en 9 de los 23 pacientes (39%); se utilizo la deteccion directa en 17 pacientes (41% informativo) e indirecta en 20 (60% informativo). Conclusiones: Los resultados demuestran la necesidad de contar con ADN del tumor, cuando el paciente fue enucleado, y acentuan la importancia de la deteccion directa de la mutacion en familias con Rb esporadico temprano sin muestra tumoral. Los estudios de biologia molecular contribuyeron con el adecuado asesoramiento genetico de pacientes argentinos y sus familiares y el diseno apropiado de su tratamiento temprano. EnglishObjective: Evaluate the relevance of RB1 mutations detection in the genetic counselling of Argentine retinoblastoma families. Methods: We included in this study 34 Argentine families with bilateral and unilateral Retinoblastoma (Rb). 130 DNA samples from leukocytes, tumors and chorionic villus were analyzed by indirect and direct molecular biology assays like Southern blot, segregation of polymorphisms BamHI, Rbi4, XbaI y Rb 1.20 (PCR-RFLP, PCR-STR), PCR-heteroduplex and sequencing of RB1 gene. Results: Molecular biology analysis was informative in 18 out of 34 families studied (53%), 56% with bilateral and 44% with unilateral Rb. DNA tumor samples of 11 patients were available and could be studied by loss of heterozygosity (LOH) detection, that allowed us to identify the mutated RB1 allele in 9 (82%) patients. When tumor samples were not analized, the studies were informative only in 9 out of 23 patients (39%); we used direct mutation detection in 17 (41% informative) and indirect assays in 20 (60% informative) patients. Conclusions: The results prove the necessity to have DNA tumor, when the patient has been enucleated, and emphasize the importance of direct mutation detection in families with early sporadic Rb without tumor sample. The RB1 molecular biology contributed to the adequate genetic counselling of Argentine patients and relatives and their appropriate early treatment planning.