Obtenção de cromossomos mitóticos em peixes: Um método alternativo para evitar a eutanásia de animais

A utilizacao de animais em pesquisas sempre foi controverso sendo a razao de diversas discussoes em funcao do grande numero necessario de especimes e do sofrimento causado aos mesmo. Com os recentes avancos da citogenetica de peixes reforca-se o interesse na analise cromossomica na area basica e aplicada da pesquisa. O protocolo mais empregado para obtencao de preparacoes cromossomicas em peixes neotropicais tem sido a tecnica "air drying", que tem por base a injecao previa de solucao de colchicina nos exemplares vivos e a retirada da porcao anterior do rim para a obtencao de uma suspensao celular. Embora esta tecnica comumente empregada resulte em preparacoes cromossomicas de qualidade, tem a desvantagem da eutanasia dos animais. As questoes eticas e morais que permeiam nossa sociedade contemporânea estabelecem alguns principios orientadores na utilizacao de animais em pesquisas cientificas. Entre estes principios estao a substituicao dos animais (replace) por outros metodos alternativos, tais como: testes in vitro, e a reducao (reduce), que determina que os pesquisadores devem utilizar o minimo de animais em um experimento. Deste modo, nosso estudo teve como objetivo experimentar e adequar uma metodologia alternativa (protocolo estabelecido por Volker e. Rab, 2015) que utiliza nadadeiras regeneradas de peixes para a obtencao de metafases mitoticas, com a vantagem de nao provocar a morte dos especimes. Foram testados um totade 24 de animais pertencentes a quatro especies diferentes: Danio rerio , Astyanax altiparanae , Oreochromis niloticus e Otothyropsis biamnicus. Os resultados obtidos demonstraram que houve variacao no tempo de regeneracao das nadadeiras entre as especies analisadas e, que o numero medio de metafases por lâmina foi igual a 4. Embora essa quantidade possa parecer pequena, o tempo para percorrer a lâmina a procura de metafases e bem menor, uma vez que as celulas ficam concentradas em uma regiao especifica da lâmina. A qualidade das metafases obtidas tambem foi satisfatoria. Desta forma, a preparacao cromossomica direta de nadadeiras regeneradas de peixes parece ser promissora na obtencao metafases em quantidade e qualidade. Este fato e de extrema importância para as analises citogeneticas, pois a melhoria nas preparacoes cromossomicas obtidas diminui a necessidade de coletas subsequentes e o uso excessivo de exemplares.