Aplicação de sistemas de análise por injeção em batelada com detecção eletroquímica para determinação de substâncias bioativas

A grande procura da humanidade por meios que favorecam uma vida longa e saudavel tem impulsionado pesquisas por novas substâncias capazes de satisfazer tais necessidades. Entre estas substâncias, destacam-se os compostos bioativos, os quais que apresentam diversas funcoes biologicas, tais como: acao antioxidante, anti-inflamatoria, protetor contra micro-organismos patogenicos, inibidor do processo de carcinogenese, protecao contra a incidencia de raios ultravioleta, entre outras. Tais compostos, uma vez presentes na natureza ou em varios produtos utilizados no cotidiano, demandam desafios direcionados ao desenvolvimento de metodologias analiticas para a determinacao de suas concentracoes. A maioria das tecnicas reportadas na literatura dependem de etapas iniciais de preparacao das amostras que demandam muito tempo, utilizam grande quantidade de reagentes (solventes) e os equipamentos associados sao de custos elevados o que torna caro o custo final das analises. Portanto, se faz necessario desenvolver tecnicas rapidas, baratas e mais sensiveis. Neste sentido, as tecnicas eletroquimicas surgem como alternativas viaveis e promissoras. Assim, o presente trabalho apresenta metodos simples, rapidos e de baixo custo para determinacao das substâncias bioativas catequina e quercetina utilizando a tecnica de analise por injecao em batelada com deteccao amperometrica convencional (BIA-AC) fazendo uso de eletrodos de carbono impresso (ECI), e empregando um eletrodo de carbono vitreo (ECV) com um sistema BIA com deteccao amperometrica de pulsos multiplos (BIA-MPA). O metodo proposto BIA-MPA e baseado na aplicacao de tres potenciais de pulso (potencial de oxidacao, de limpeza e de condicionamento) vs Ag/AgCl/KClsat, evitando a passivacao por produtos de oxidacao e permitindo a quantificacao. Os metodos propostos apresentaram resultados satisfatorios. O BIA-MPA apresentou um intervalo linear de 20 a 100 μmol L−1 (R = 0,999), com limite de deteccao (LD) de 0,03 μmol L─1 e limite de quantificacao (LQ) 0,10 μmol L−1 que possibilitou a determinacao de catequina em amostras de cha verde e extratos de plantas medicinais. A repetibilidade do metodo para injecoes sucessivas de catequina a 50 μmol L−1 (n = 30) apresentou um desvio padrao relativo (DPR) de 0,85%. Ja o metodo BIA-AC na determinacao da catequina, mostrou um intervalo linear de 1 a 150 μmol L−1 (R = 0,999), com LD e LQ de 0,021 e 0,070 μmol L−1 e, a estabilidade do metodo foi avaliada com injecoes sucessivas de 50 μmol L−1 de catequina, apresentando um DPR = 1,03% (n = 30). Ambos os metodos apresentaram taxa de amostragem de 120 injecoes por hora. Adicionalmente, a determinacao da quercetina usando o metodo BIA-MPA mostrou-se preciso (DPR de 0,74%; n = 30), rapido (72 injecoes h−1) com baixos LD (0,004 μmol L−1) e LQ (10 μmol L−1), e utilizando o metodo BIA-AC tambem se mostrou preciso (DPR de 1,06%; n= 30) e rapido (120 injecoes h−1), com LD de 0,027 μmol L−1 e LQ de 10 μmol L−1. Ambos os metodos, apresentaram intervalo linear de 10 a 150 μmol L−1. Aplicacoes destas metodologias na determinacao de quercetina em amostras de extratos das folhas das plantas medicinais apresentaram resultados consistentes com os obtidos por cromatografia liquida de alta eficiencia (HPLC), com nivel de confianca de 95%. Os metodos propostos apresentaram resultados favoraveis como: baixo custo operacional, procedimento simples de preparo das amostras (somente dissolucao e diluicao), boa frequencia analitica, alta precisao, baixo consumo de reagente e amostras e, consequentemente, geracao de pequena quantidade de residuos por analise. Adicionalmente, as caracteristicas de portabilidade dos sistemas BIA, permitem serem aplicados em analises no campo.