Redirection chimiotactique des neutrophiles pour l’immunothérapie du cancer.

L'usage des neutrophiles pour l'immunotherapie du cancer est une avenue prometteuse qui est par contre peu exploree. Puisque les neutrophiles possedent une puissante activite cytotoxique, leur recrutement a des cellules cancereuses pourrait avoir un potentiel anti-tumoral qui serait plus specifique que les traitements conventionnels comme la chimiotherapie ou la radiotherapie. Il a ete demontre lors de ce projet que la surexpression d'une proteine etrangere en bacteries permettait de produire des proteines majoritairement formylees. La production de proteines toxiques en bacteries necessite par contre l'utilisation d'un systeme d'expression permettant d'exercer un controle hautement regule de la transcription. Plusieurs souches d'expression bacteriennes ont ete evaluees et seules les BL21-SI et les ToplO F' se sont averees permissives a la production de proteines toxiques. La souche bacterienne permettant de produire de maniere cytoplasmique des scFvs fonctionnels utilise le promoteur lac qui est hautement fuyant. La forte toxicite observee lors de l'expression en bacteries de scFvs a demontre que cette souche bacterienne ne pourrait etre utilisee. Afin de pallier aux problemes associes a la production de scFvs formyles fonctionnels en bacteries, l'anticorps anti-CEA T84.66 a ete conjugue chimiquement a un peptide synthetique formyle. Des analyses en cytometrie en flux et des tests de chimotactie ont permis de demontrer que les proteines formylees produites en bacteries ou par conjugaison chimique possedaient une forte activite biologique et pourraient etre utilisees comme agents chimiotactiques. Certaines analyses restent a faire afin de terminer la validation du modele in vitro. Les molecules generees au cours de ce projet de recherche pourront par la suite etre utilisees dans des modeles in vivo afin d'evaluer leur potentiel anti-tumoral.