Identification de cyclobenzaprine lors de recherche de toxiques : impureté ou réelle consommation ?

Objectif La cyclobenzaprine est une substance myorelaxante non commercialisee en Europe mais facilement disponible sur Internet. Suite a la detection de cette molecule conjointement a celle d’amitriptyline lors d’un screening toxicologique sanguin realise pour deux patientes, nous avons cherche a definir si cette substance provenait : – d’une reelle consommation ; – d’une impurete presente dans la specialite commerciale ; – si elle etait generee lors du protocole d’extraction. Methodes Un screening toxicologique qualitatif cible par LC-MS/MS (detectant la cyclobenzaprine et l’amitriptyline) a ete realise dans un echantillon sanguin de deux patientes, et dans une solution commerciale injectable. Apres ajout des etalons internes (doxepine-D3 et diazepam-D5), les echantillons subissent successivement une extraction en milieu basique par butyl acetate puis une seconde en milieu acide par un melange dichloromethane/isopropanol (95/5, v/v). Apres evaporation a sec sous azote, les residus sont repris par un melange des phases mobiles, et 30 μL sont injectes dans le systeme LC-MS/MS (5500 QTRAP, Sciex ® ). La solution commerciale injectable d’amytriptiline (un seul lot disponible) a ete analysee sans traitement prealable et apres le processus d’extraction. Les lots des formes per os prises par les deux patientes n’ont pas pu etre identifies a posteriori. Resultats Les temps de retention observes de la cyclobenzaprine et de l’amitriptyline sont respectivement 6,6 min et 8,4 min. Ces deux molecules ont ete identifiees dans l’ensemble des echantillons par leur spectre de masses respectif. L’analyse de la solution injectable commerciale avant et apres extraction a revelee des intensites identiques pour les pics chromatographiques correspondants aux deux molecules d’interets. L’intensite de la cyclobenzaprine etait superieure a l’intensite de l’amitriptyline (ratio intensite de l’amitriptyline/intensite de la cyclobenzaprine = 0,58). L’inverse est observe dans les prelevements sanguins des deux patientes (ratio = 50 et 31,5). Il n’y a pas eu de quantification de ces deux substances. Conclusion Les resultats permettent d’eliminer l’hypothese d’une impurete generee lors de l’extraction et confirme la presence d’une impurete dans la specialite commerciale. Structurellement, la cyclobenzaprine ne differe de l’amitriptyline que par une double liaison au niveau du cycle cycloheptane central, tout comme leur metabolite demethyle, la norcyclobenzaprine et la nortriptyline [1] . La Pharmacopee Europeenne indique que la cyclobenzaprine est une impurete de fabrication de l’amitriptyline qui ne doit pas exceder 0,1 % de la matiere seche [2] . L’intensite du signal analytique de la cyclobenzaprine superieure a celle de l’amitriptyline peut rendre l’interpretation delicate. Ainsi, sans quantification des deux substances, nous ne pouvons exclure que la presence de cyclobenzaprine resulte a la fois de la consommation d’amitriptyline et de cyclobenzaprine autrement que par l’anamnese des deux patientes concernees.