Detección de anticuerpos anti-RNP y anti-Sm mediante immunoblotting y contrainmunoelectroforesis utilizando el mismo extracto de timo de conejo

Las tecnicas de contrainmunoelectroforesis (CIE) y ELISA son utiles para detectar anticuerpos anti-RNP y anti-Sm,pero no identifican los anticuerpos dirigidos contra los diferentes polipeptidos asociados a RNP/Sm.Estos anticuerpos pueden detectarse mediante immunoblotting (IB) con extractos de celulas HeLa u otras mantenidad en cultivo.Objetivos:Determinar si el mismo extracto de timo de conejo utilizado en la CIE puede ser una alternativa valida ppara detectar mediante IB los anticuerpos dirigidos contra los diferentes polipepticos asociados a RNP/Sm.Metodos:Hemos estudiado 342 sueros de 250 pacientes con enfermedades inflamatorias del tejido conjuntivo.Los anticuerpos anti-RNP y anti-Sm fueron detectados mediante CIE e IB utilizando como sustrato el mismo extracto comercial de timo de conejo.Resultados: Este IB permitio anticuerpos dirigidos contra los polipeptidos 70kD,A,BB',C y D,aunque el de 70D estaba degradado.Se detectaron anticuerpos anti-RNP y anti-Sm por CIE en el 7,3 por ciento (25 de 342) y de 6,1 (21 de 342) de los sueros , y mediante IB en el 14,9 por ciento (51 de 342) y de 14,3//(49 de 342) de los sueros,respectivamente.En 72 pacientes con lupus eritematoso sistemico la sensibilidad y especificidad de la CIE fueron del 19,1//y del 96,5//para anti-RNP,y del 11,1 del del 100//para anti-Sm.La sensibilidad y especificidad del IB fueron del 22,2 y del 96//para anti-RNP 70 kD y del 19,4 y del 100//para anti-SmD. Conclusiones: A pesar de la degradacion proteolitica , el IB con un extracto soluble de timo de conejo puede ser una alternativa valida como complemento de la CIE o del ELISA en la deteccion de anticuerpos anti-RNP y anti-Sm,y esta al alcance de cualquier laboratorio clinico.