鸭疫里默氏杆菌MFS外排泵 rant 基因缺失株的构建及其介导的耐药性

旨在构建鸭疫里默氏杆菌rant基因缺失株及回复株，明确MFS外排泵Rant对鸭疫里默氏杆菌耐药性的影响。本研究以鸭疫里默氏杆菌RA-LZ01株为研究对象，通过自杀质粒pRE112介导的同源重组，以红霉素抗性标记进行正向筛选，获得基因缺失株Δrant，并以大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭质粒pCPRA作为载体，构建回复株cΔrant。采用微量肉汤稀释法测定11类临床常用抗生素对野生株、缺失株及回复株的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），并测定3株菌的生长曲线，评价菌株对雏鸭的致病能力。结果表明，与野生株和回复株相比，四环素类抗生素对缺失株的MIC值明显下降，其他类抗生素的MIC值无变化；缺失株的生长速率明显下降；rant基因的缺失显著降低鸭疫里默氏杆菌的毒力。结果提示，鸭疫里默氏杆菌rant基因介导四环素类抗生素的外排，并可明显影响鸭疫里默氏杆菌的生长和毒力。