In vitro and in vivo application of RNA interference for targeting genes involved in peritrophic matrix synthesis in a lepidopteran system

2013 
大多数昆虫的 midgut 与一个半渗透的非细胞组成的试管被衬里, peritrophic 矩阵(下午) ,几丁质和蛋白质镇静。尽管各种各样的基因编码下午蛋白质被描绘了,我们他们在下午结构和功能的角色的理解是很有限的。为获得功能的信息的一条有希望的途径是 RNA 干扰,它被用来减少使用任何一个注射予幼虫以的双 stranded RNA 或喂的特定的 mRNAs 的层次。尽管这个方法很好在 dipterans 和甲虫类之昆虫被记录,它在 lepidopterans 的成功的报告被改变。在当前的学习,编码下午蛋白质的 silencing midgut 基因(昆虫肠的粘蛋白 1 ,昆虫肠的粘蛋白 4 ,下午蛋白质 1 )并且几丁质 biosynthetic 或修改的酶(几丁质 synthase-B 和几丁质 deacetylase 1 )在 noctuid 鳞翅类, Mamestra configurata ,在 vitro 并且在 vivo 被检验。在在主要 midgut 的 vitro 研究,上皮的房间准备揭示了尖锐、快速的 silencing (由 24 h ) 为编码几丁质 deacetylase 的基因 1 并且 silencing 的更慢的率(由 72 h ) 为编码下午蛋白质 1 的基因。肠的粘蛋白是的基因编码昆虫稍微由 72 h 的 silenced,而没有 silencing 为编码几丁质 synthase-B 的基因被检测。在 vivo,实验集中了于几丁质 deacetylase 1 基因是 silenced 到在 vitro 的最大的程度。与双 stranded RNA 的出生不满一月的婴儿和第四个中间形态幼虫的连续的喂导致了几丁质 deacetylase 的 silencing 1 由 24 和 36 h 分别地。喂单个剂量到出生不满一月的婴儿也由 24 h 导致了 silencing。当前的学习证明基因编码下午蛋白质能是为 RNA 干扰由的 silenced 和轮廓条件每在 lepidopterans 喂的 os。
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