含NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体的真核表达

为进一步提高重组病毒的表达水平,用构建的含gB启动子和NDV F48E9株F基因的MDVCVI988株转移质粒载体pUS10F转染293 T细胞,通过PCR和接免疫荧光（IFA）法研究了其在真核中的表达,并确定最佳的转染条件.结果表明,真核细胞中带有F基因,转移质粒载体已经进入细胞DNA;转染转移质粒载体pUS10F后的293 T细胞所表达的NDV F基因产物抗原性较好,能够与抗NDV的标准血清反应.确定的最佳转染条件为：DNA 3μg/mL,转染后48 h外源基因在细胞中的表达量最高,在6孔板和96孔板中细胞数量分别以2×105/孔和1×10^4/孔的转染效果最好.