Aktivitas amilase bakteri amilolitik asal larva black soldier fly (Hermetia illucens)

Abstract Amylase is an enzyme that has been widely used as a biocatalyst in food and bioethanol industries. The avai la bility of thermostable amylase will further expand the market and extend the shelf life of this enzyme. Amylase is produced by amylolytic bacteria using media with  high-cost nitrogen sources , such as pepton. B lack soldier fly (BSF)  is a potential source of amylolitic bacteria since its ability to degrade organic matters rapidly.  This  research  aimed to explore amylolitic bacteria from the larvae of BSF with highest amylase activity  that can be produced using low-cost media.  The screening of amylase activity  was conducted by culturing the bacteria  on starch containing media. Bacteria with the highest amylase activity were cultured in liquid media with two different nitrogen sources (urea and nitrate). Determinations of the optimum pH and temperature for this enzyme activity were carried out in the pH range 4 to  7 and temperature 35 to  65 oC. Three amylase-producing isolates were obtained in this study. M1 isolate which has the highest activity was characterized  based on catalase activity and Gram staining . The results showed that the M1 isolate  might belong to genus  Proteus sp.  At the optimum condition ( 45 oC and pH 7 ) , amylase  activity in nitrate media was 0.79 1 U/mL , which was about 18-folds higher than that in urea medi a ( 0,041 U/mL).  Thus, amylase isolated from BSF larvae can be classified as a mesophilic enzyme and has the potential to be developed commercially at lower production costs. [ Keywords: crude extract enzyme, Proteus  sp., thermostable ] Abstrak Amilase merupakan salah satu enzim yangtelah digunakan secara luas sebagai biokatalis dalam industri pangan dan bioetanol.Ketersediaan amilase termostabil akan semakin memperluas pasar dan memperpanjang daya simpan enzim ini. Selama ini, produksi amilase dilakukan dengan memanfaatkan bakteri amilolitik menggunakan media dengan sumber nitrogen yang mahal, misalnya pepton.  B lack soldier fly  (BSF) merupakan sumber bakteri amilolitik yang potential karena BSF memiliki kemampuan mendegradasi bahan organik dengan cepat.  Penelitian ini bertujuan untuk mengeksplorasi bakteri amilolitik dengan kemampuan amilase tinggi yang dapat diproduksi menggunakan media yanglebihmurah.Skrining bakteri penghasil amilase dilakukan dengan menumbuhkan bakteri pada media yang mengandung pati. Bakteri dengan aktivitas amilase tertinggi dikulturkan dalam media cair dengan dua sumber nitrogenyang berbeda, yaitu urea dan nitrat. PenentuanpH dan suhu optimum aktivitas enzim ini dilakukan pada rentang pH 4sampai 7 dan suhu 35sampai 65 oC.Tiga isolat penghasil amilase diperoleh dalam penelitian ini. Isolat M1 yang memiliki aktivitas tertinggi dikarakterisasi berdasarkan uji katalasedan uji pewarnaan Gram. Hasilnya menunjukkan bahwa isolat M1 termasukgenus  Proteus  sp. Pada kondisi optimum (suhu 45 o C dan pH 7), aktivitas amilase pada media nitrat adalah 0,791 U/mL, lebih kurang 18 kali lebih tinggi dibanding aktivitas pada media urea (0,041 U/mL). Dengan demikian, amilase yang dihasilkan oleh bakteri asallarva BSF merupakan enzim mesofilik dan berpotensi untuk dikembangkan secara komersial dengan biaya produksi yang lebih murah. [Kata kunci: enzim ekstrak kasar,  Proteus sp.,termostabil]