河田鸡与艾维茵肉鸡睾丸N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的特性比较

河田鸡和艾维菌肉鸡的睾丸，经硫酸铵分级沉淀、DEAE-32离子交换柱层析，获得比活力为54．84U·rag～，纯化倍数为8．86的河田鸡睾丸N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）制剂．艾维菌肉鸡睾丸NAGase经SephacryS-300凝胶过滤层析柱进一步纯化，获得比活力为171．50U·mg-1，纯化倍数为19．8倍的NAGase制剂．以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（pNP-NAG）为底物，研究酶催化底物水解的反应动力学．结果表明：河田鸡和艾维菌肉鸡睾丸NAGase的最适pH分别为5．6、5．7，最适温度分别为55、50℃；NAGase分别在pH为3．0—9．2、4．0-9．2及温度为10-60、10-30℃下能保持稳定；NAGase酶促反应动力学均符合米氏双曲线方程，测得米氏常数（k）分别为0．223、0．319mmol·L-1，最大反应速度（k）分别为9．438、6．238μmol·L-1·min-1；NAGase催化pNP-NAG反应的活化能分别为85．74、73．47kJ·mol-1．