Identificacio de nous elements reguladors en el promotor de glut1

En esta tesis se han identificado nuevos elementos que dirigen la actividad transcripcional del promotor de GLUTI1 y su importancia en la regulacion de este promotor en un modelo de hipertrofia cardiaca y por la proteina supresora de tumores p53: -Se ha caracterizado una region en la posicion -46/-37 del promotor de GLUTI1 de rata que une factores especificos de musculo, de forma dependiente de diferenciacion y de desarrollo (MDDE), de naturaleza desconocida. MDDE contribuye a la actividad basal del promotor tanto en mioblastos y miotubos como en cardiomitos neonatales y permite la maxima estimulacion de la actividad transcripcional frente al AMPc y Sp1 en mioblastos L6E9, y al suero en cardiomiocitos neonatales. Hemos propuesto que MDDE opera, tanto sinergicamente con Sp1 como en ausencia de este, como lugar central en el mecanismo de regulacion del mantenimiento de la actividad transcripcional del promotor de GLUT1. -Otra region estudiada ha sido la -69/-55 en la que se ha determinado la union de factores de transcripcion de forma dependiente del estado de proliferacion y se requiere de la integridad de 8Cs en el estado proliferativo (caja C8). La caja C8 regula negativamente la actividad transcripcional en celulas proliferativas de manera dependiente de suero. -Hemos identificado otra posible caja AP1(+41/+62) que podria ser, al menos en parte, responsable de los efectos estimuladores de c-Jun. -El tratamiento de cardiomiocitos neonatales con fenilefrina provoca un fenotipo hipertrofico que provoca un incremento en la expresion de la proteina GLUT1. Una parte de este incremento de debe a una mas elevada actividad transcripcional del promotor de GLUT1, y la integridad de las cajas GC, MDDE,y TATA es requerida en la respuesta. Ademas las proteinas Ras y c-Jun estan implicadas en estos efectos. -La proteina p53 presentea efectos contrapuestos sobre la actividad transcripcional de GLUT1. En celulas 10T1/