Contribution à l'étude de protéines impliquées dans le contrôle de la stabilité des ARNm chez le xénope

La proteine EDEN-BP se lie au motif EDEN riche en U/purine et est impliquee dans la desadenylation d'ARNm. EDEN-BP presente 3 motifs de liaison a l'ARN (RRM, RNA Recognition Motif). Les 2 premiers RRM sont situes en N-terminal et une region "linker" les separent du troisieme RRM situe en C-terminal. La cartographie des domaines d'EDEN-BP necessaires a la reconnaissance specifique d'EDEN a ete realisee a l'aide de proteines recombinantes en utilisant la technique du transfert de marquage. Les RRM1 et 2, et une information de sequence dans le "linker" sont necessaires a la fixation d'EDEN-BP a l'EDEN. Des experiences de gel-retard et de double hybride indiquent que la forme active du complexe EDEN/EDEN-BP contient un dimere d'EDEN-BP. Par ailleurs, la chromatographie d'affinite avec ligand ARN a ete mise au point pour purifier des facteurs impliques dans la destabilisation des ARN presentant un motif AUUUA chez le xenope. 6 facteurs specifiques de ce motif ont ete observes.