Comparison of biological features of C3A and L-02 hepatocytes undergoing subzero nonfreezing storage for use in bioartificial liver support system

目的:比较UW液零下非结冰(-0.8℃)保存后C3A与L-02细胞的生物学特性,探索其对生物人工肝的应用价值.方法:贴壁培养C3A与L-02细胞,0.25%胰酶消化,制备成细胞悬液,细胞浓度调至2×109/L,分装至2mL冻存管,UW液-0.8℃保存0、24、48及72h后,分别测定细胞存活率与凋亡率、AST与LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果:随着低温保存时间的延长,细胞存活率逐渐下降,但72hC3A细胞存活率明显高于L-02细胞(86.49%±2.80%vs70.17%±2.82%,P<0.001);细胞凋亡率亦逐渐上升,但72hC3A细胞凋亡率低于L-02细胞(1.26%±0.84%vs5.73%±1.68%,P<0.001);AST及LDH的释放量逐渐增加,但72hC3A细胞低于L-02细胞(4.61U/L±0.43U/Lvs6.22U/L±0.65U/L,P<0.001;86.10U/L±11.10U/Lvs113.88U/L±5.64U/L,P<0.001).尿素合成功能呈下降的趋势,但72hL-02细胞明显优于C3A细胞(1.01mmol/L±0.14mmol/Lvs0.60mmol/L±0.06mmol/L,P<0.001).白蛋白分泌功能逐渐降低,但72hC3A细胞明显优于L-02细胞(2.060g/L±0.220g/Lvs9.04mg/L±0.53mg/L,P<0.001).结论:UW液-0.8℃保存C3A与L-02细胞72h仍然可以满足生物人工肝支持系统的需要.以L-02细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并肝性脑病,以C3A细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并低白蛋白血症.