Различия в апоптотическом ответе линий клеток MCF-7 и MDA-MB-231 рака молочной железы человека, зараженных рекомбинантным аденовирусом, содержащим генVP2вируса инфекционной болезни бурсы

Рекомбинантный аденовирус, содержащий ген VP2 вируса инфекционной болезни бурсы (ADV-VP2), обладает мощным противоопухолевым действием, обусловленным способностью индуцировать апоптоз в раковых клетках. В представленной работе клетки MCF-7 и MDA-MB-231 рака молочной железы человека инфицировали ADV-VP2. Через 4 ч после инфицирования в клетках MCF-7 наблюдали появление белка VP2. Анализ фрагментации ДНК в разные временные точки показал, что клетки MCF-7 и MDA-MB-231 вступали в апоптоз уже через 8 и 12 ч после заражения соответственно. В клетках MCF-7 и MDA-MB-231 апоптоз индуцировался через разные промежутки времени после инфицирования, но продолжался в течение 36 ч. Индукция апоптоза под действием ADV-VP2 подтверждена методом TUNEL с темно-коричневым окрашиванием апоптотических клеток. С использованием количественной проточной цитометрии с двойным окрашиванием клеток аннексином V/P1 анализировали различные стадии апоптоза. Обработанные ADV-VP2 культуры MCF-7 и MDA-MB-231 содержали 25.58 ± 9.02 и 14.51 ± 3.12% клеток на ранних и 6.09 ± 4.06 и 77.12 ± 5.09% на поздних стадиях апоптоза соответственно. Выявлены существенные различия в числе клеток двух типов, находящихся на ранних и поздних стадиях апоптоза, а также в числе живых и апоптотических клеток, обработанных ADV-VP2. Действие ADV-VP2 на линии клеток рака молочной железы человека показано тремя методами. По-видимому, с использованием ADV-VP2 можно будет получить вакцину, предназначенную для генотерапии рака.