PCR-RFLP 方法检测和鉴别五种李斯特菌

目的建立快速检测和鉴别单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔李斯特菌和格氏李斯特菌等5种常见李斯特菌的方法.方法采用 PCR-RFLP 技术,首先通过引物“Lis1A-Lis1B”对李斯特菌属 iap 基因进行扩增,扩增产物大小约1.4 kb,然后用限制性内切酶 Dde Ⅰ对 PCR 产物进行酶切,电泳观察具有种间特异性的酶切谱带进行鉴别.结果上述5种李斯特菌的 PCR 扩增产物经内切酶 Dde Ⅰ消化后,得到片段大小不同、具有种间差异的特异性酶切图谱.结论本实验建立的 PCR-RFLP 方法可以用于上述5种常见李斯特菌的快速检测和鉴定.