团头鲂 oct4 基因真核表达载体的构建与表达

八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）在干细胞多能性维持、胚胎早期发育和体细胞重编程等过程中具有重要作用，构建团头鲂oct4基因真核表达载体可为进一步研究该基因的功能提供实用工具。通过PCR方法从含有团头鲂oct4基因开放阅读框序列的载体pCS2+Maoct4中获得基因编码片段，连入真核表达载体pCVpr，构建重组的融合表达载体pCMV-Maoct4-Red；经酶切和测序鉴定后，采用脂质体法将该载体转染HepG2细胞，观察到细胞中红色荧光主要定位于细胞核，并采用Western blot方法分析融合蛋白的正确表达。成功构建了团头鲂oct4基因荧光真核表达载体pCMV-Maoct4-Red，该载体可用于真核细胞的核定位标记，为后续研究鱼类oct4基因的作用机制奠定了基础。