SYBR Green I荧光定量RT—PCR检测埃博拉病毒方法的建立

为了建立一种快速准确的检测埃博拉病毒（EBOV）亚型的方法。本研究根据GenBank中公布的EBOVNP基因序列，通过设计引物和优化反应条件，建立了一种SYBRGreenI荧光定量RT—PCR检测方法检测EBOV。以体外转录的EBOVRNA为模板进行试验，该方法检测的灵敏度可以达到1．0×10^2个拷贝／μL，检测范围达到9个数量级为10^2～10^10，可检测5种亚型EBOV。建立的方法对马尔堡病毒（MARV）、登革病毒（DENV）、新疆出血热病毒（XHFV）、乙型脑炎病毒（JEV）、流感病毒（HIN1和H3N2）和猪繁殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）E基因组RNA无非特异性扩增。本文将荧光定量RT-PCR技术用于埃博拉病毒的定量检测中，并且建立了EBOVSYBR Green I荧光定量RT—PCR检测方法。