MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育

目的：探讨microRNA-450a-3p（miR-450a-3p）对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现.方法：用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3＇-非翻译区（untranslated region,UTR）;用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEFs）增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响.结果：miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3＇-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响.miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常.结论：miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育.