PHA sintase de Xanthomonas axonopodis pv. citri: influência na patogenicidade e produção de proteína recombinante em Escherichia coli

A enzima PHA sintase atua na sintese de poli-hidroxialcanoatos, que na forma de grânulos intracelu­lares constituem substâncias de reserva da celula e podem, ainda, dar formacao a biopolimeros. Um mutante de Xanthomonas axonopodis pv. citri ( Xac ) foi identificado como tendo a subunidade E da enzima PHA sintase mutada. Este mutante quando inoculado em planta citrica hospedeira foi capaz de induzir sintomas de cancro-citrico distinto do que normalmente e observado para a Xac selvagem. Atraves de inoculacao em planta hospedeira o perfil de crescimento da Xac selvagem e da Xac mu­tada na enzima PHA sintase foi avaliado, comparou-se o crescimento dessas bacterias, selvagem e mutante de Xac ao longo da infeccao.  As curvas de crescimento revelaram que o mutante de Xac para a enzima PHA sintase cresceu menos que a Xac selvagem nos dois primeiros dias de infeccao, contudo, a partir dai nao foi encontrada diferenca significativa de crescimento entre selvagem e mu­tante, ate o periodo final de infeccao, que foi de 14 dias. Visando a estudos estruturais da subunidade E da enzima PHA sintase da Xac , o gene codificador desta proteina foi clonado em vetor de expres­sao, e a proteina recombinante foi produzida em Escherichia coli na forma soluvel.