Utilisation d'un marqueur de spin, le proxyl-opc, pour des experiences de competition en rpe. Modification par deux analogues structuraux, l'opc et le pentyl-opc, de l'equilibre b-z in vitro. Degradation oxydative de l'adn par la riboflavine irradiee dans le visible

Partie a: nous avons mis au point une technique de competition en rpe, utilisant le marqueur de spin proxyl-opc. La fixation du proxyl-opc sur les acides nucleiques a ete etudiee en spectrometrie d'absorption uv et en rpe. Le proxyl-opc se fixe dans le petit sillon de l'adn double-brin avec une specificite pour les paires de bases gc. Nous avons defini, a partir des spectres rpe du proxyl-opc libre en solution ou fixe a l'adn, un parametre caracteristique de l'affinite du proxyl-opc pour un acide nucleique: le binding index (bi). Le bi a ete utilise pour mettre au point une methode de competition, adaptee aux ligands se fixant dans le petit sillon. Cette methode a ete appliquee a l'etude des lexitropsines. Partie b: nous avons etudie l'effet sur l'equilibre b-z du polyd(g-m5c), in vitro, de deux analogues structuraux: l'opc et le pentyl-opc. Ces deux ligands ont des affinites comparables pour la forme b des acides nucleiques, mais ont des modes de fixation differents, l'un intercalant, l'autre non intercalant. Le pentyl-opc, contrairement a l'opc, n'a montre qu'une faible capacite a, d'une part induire une transition z-b du polyd(g-m5c), d'autre part inhiber la transition b-z provoquee par un saut de concentration saline. L'utilisation analytique du pentyl-opc pour l'etude des transitions z-b in vitro est decrite. Partie c: nous avons montre que la riboflavine irradiee dans le visible est capable d'induire des coupures simple- ou double-brin sur l'adn superenroule de pbr322. Nous avons verifie par spin-trapping et reduction du cytochrome c que cette degradation passe par la generation de radicaux libres derives de l'oxygene: radical hydroxyl et anion superoxide. Nous avons montre que les coupures induites par la riboflavine sont aleatoires