1株降解黄曲霉毒素B 1 的解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及其体外脱毒效果

旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的菌株，并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究，本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛，以对AFB1的降解率为指标进行复筛，并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定；通过测定该菌株不同发酵组分对AFB1的降解率，来定位其脱毒活性组分，同时采用CCK-8法测定活性组分降解AFB1后对LMH细胞毒性，并研究了热处理、紫外线照射、强酸、强碱及蛋白酶K处理对活性组分脱毒作用的影响。结果显示，从样品中初筛分离到24株能够在初筛培养基生长良好的菌株，经复筛从中筛选到一株能高效降解AFB1的菌株Y1-B1，其AFB1降解率达到73.2%；经形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析确定该菌为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。对菌株Y1-B1培养物的不同组分进行的脱毒活性研究表明，不同组分对AFB1的降解率不同，上清液的脱毒能力最强，细菌细胞裂解物的脱毒能力下降明显，菌体悬液和菌体裂解物上清的脱毒能力最差，由此确定解淀粉芽胞杆菌Y1-B1的脱毒能力主要来源于上清液中的某种活性物质；细胞毒性结果显示，与AFB1对LMH细胞的毒性作用相比，AFB1被上清液降解后其产物的毒性显著降低。该脱毒活性组分对不同理化因素处理呈现出不同的表现，对高温、紫外照射抵抗力较强，对强酸、强碱抵抗力较差，蛋白酶K仅造成脱毒能力部分减弱。本研究将为解决黄曲霉毒素污染问题提供新的微生物种质资源，同时为后续微生物脱毒制剂的开发奠定基础。