Identificação de portador renal crônico em ovinos naturalmente infectados por Leptospira sp

O presente trabalho relata a identificacao, por metodos sorologicos e moleculares, do estado de portador renal cronico de Leptospira sp. em ovinos naturalmente infectados. Foram colhidas amostras de 80 ovinos, que nao apresentaram, no momento da colheita, qualquer sinal clinico sugestivo de leptospirose. Logo apos o exame fisico, realizou-se a obtencao de amostra sanguinea por meio da puncao asseptica da veia jugular, com o metodo a vacuo. Em seguida, o sangue foi devidamente identificado, mantido em refrigeracao (4oC) e transportado para o Laboratorio de Bacterioses do Hospital de Medicina Veterinaria da UFBA. As amostras foram centrifugadas (1000 × g por 10 minutos) e o soro foi extraido, identificado e armazenado em duplicata em microtubos de 1,5 mL a -20°C ate o seu processamento. As amostras foram submetidas a tecnica de soroaglutinacao microscopica com antigenos vivos com a finalidade de observar sororeatividade. Identificaram-se vinte e nove amostras reativas com titulos entre 200 e 400 (29/80 – 36,25%), quarenta e quatro amostras com titulo entre 100 e 200 (44/80 – 55%) e sete amostras com titulo menor que 100 (7/80 – 8,75%), portanto, classificados como nao reativas. Os sorovares mais frequentes foram Hebdomadis, Copenhageni M20, Wolffi, Grippotyphosa e Bratislava. Feita a triagem com a sorologia foram selecionados para investigacao molecular, amostras de dez animais, sendo nove deles com titulos acima de 200 e um com titulo abaixo de 100, mas com historico de abortamento. A deteccao do DNA de leptospiras na urina foi realizada com a tecnica do PCR, extraido pelo Wizard SV Genomic DNA Purification System (Promega, Madison, EUA) de acordo com recomendacoes do fabricante. No ensaio da reacao em cadeia da polimerase (PCR) para a deteccao do gene LipL32 (presente apenas em leptospiras patogenicas) foram empregados os “primers” LipL32-45F (5'-AAG CAT TAC CGC TTG TGG TG-3') e LipL32-286R (5'-GAA CTC CCA TTT CAG CGA TT-3'). Das dez amostras selecionadas, seis foram positivas (6/10 – 60%), sendo 5 delas com titulo acima de 200 e uma com titulo abaixo de 100. A identificacao de portadores renais assintomaticos demonstra a circulacao do agente no plantel, alem de reforcar a necessidade de adequacao no manejo sanitario. Desta forma, conclui-se que o uso da MAT como metodo de triagem e da PCR como metodo definitivo de diagnostico contribui para caracterizacao sanitaria quanto a leptospirose, bem como a intervencao sanitaria no plantel.