Desarrollo de la tecnica de fiction multicolor: aplicaciones en el diagnostico e investigacion de los linfomas malignos

Las tecnicas interdisciplinares que permiten la caracterizacion fenotipica y genotipica de las celulas tumorales se estan estableciendo como herramientas importantes para el diagnostico e investigacion de los tumores malignos. Uno de estos metodos es la tecnica de FICTION (Fluorescence Immunophenotyping and Interphase Cytogenetics as a Tool for the Investigation of Neoplasms). Esta tecnica permite analizar simultaneamente los aspectos morfologicos, inmunofenotipicos y geneticos de las celulas tumorales. Hasta la fecha las aplicaciones de la tecnica de FICTION han estado limitadas por el escaso numero de sustancias fluorescentes utilizadas. En este trabajo, y para solucionar dicha limitacion, se ha desarrollado una tecnica denominada FICTION multiculor (M-FICTION),que ademas de estudiar la morfologia y el inmunofenotipo celulares,permite la deteccion de alteraciones geneticas multiples. Se han desarrollado tres ensayos de M-FICTION para el diagnostico de los linfomas no-Hodgkin de celulas B(LNH-B), las neoplasias de celulas T(NCT) y el linfoma anaplasico de celulas grandes(LACG), mediante el uso de anticuerpos anti-CD20,-CD3 y ALK, respectivamente, en combinacion con sondas de hibridacion para las alteraciones geneticas primarias asociadas a los citados linfomas. Para el linfoma de Hodgkin, cuyas alteraciones geneticas asociadas son todavia una incognita, se disenaron ensayos de FICTION y M-FICTION para estudiar la implicacion de los genes REL e IGH. Para demostrar la validez de la tecnica, los ensayos para los LNH-B, NCT y LACG se aplicaron en controles negativos y positivos, estableciendo asi su aplicabilidad diagnostica. En el linfoma de Hodgkin(LH), se determino que tanto las translocaciones del gen IGH como las amplificaciones de gen REL son dos de las alteraciones geneticas mas frecuentes asociadas al LH. Las aplicaciones de la tecnica de M-FICTION no estan restringidas a las neoplasias hematologicas y, en un futuro pr