桑根酮C通过激活caspase 3及caspase 9诱导前列腺癌PC3细胞凋亡

目的探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制。 方法MTT法检测桑根酮C对PC3细胞増殖的抑制作用：实验分6组，分别加入不同浓度的桑根酮C（0、1、5、20、50、100 μmol/L），作用24 h检测细胞生长抑制率；20 μmol/L桑根酮C加入PC3细胞，分别于0、6、12、24、48 h收集细胞，MTT法检测生长抑制率。流式细胞技术检测细胞凋亡率：20 μmol/L桑根酮C加入PC3细胞，分别于0、12、24、48 h收集细胞检测凋亡率。荧光分光光度计检测caspase 3的活性：20 μmol/L桑根酮C作用PC3细胞，分别在0、6、12、18、24、48 h收集细胞，检测caspases 3的活性。MTT法检测caspase 3、caspase 8及caspase 9抑制剂对桑根酮C抑制PC3细胞增殖的影响：实验分4组，分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-LEHD-fmk及z-IETD-fmk，1 h加入桑根酮C，24 h收集细胞，MTT法计算细胞生长抑制率。 结果桑根酮C能抑制PC3细胞的增殖，呈剂量、时间依赖性，桑根酮C 1、5、20、50、100 μmol/L作用PC3细胞24 h的增值抑制率分别为：4.86%、12.92%、52.34%、82.05%、87.45%，1 μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义（ P ＞0.05），其他组与对照组相比差异有统计学意义（ P ＜0.05）。半数有效抑制浓度IC 50 为18.76 μmol/L。20 μmol/L桑根酮C作用PC3细胞，分别在6、12、24、48、72 h检测增值抑制率为：10.57%、27.09%、51.88%、80.73%、87.99%，与对照组相比差异均有统计学意义（ P ＜0.05）。20 μmol/L桑根酮C可诱导PC3细胞的凋亡，在12、24、48 h的凋亡率分别为：7.43%、20.91%、37.56%，与对照组相比差异有统计学意义（ P ＜0.05）。检测caspases 3的活性18 h比对照组增加了7.6倍，应用caspase抑制剂后发现caspase 3及caspase 9的抑制剂可显著逆转桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用，抑制率从52.48%降到24.29%及28.81%，与对照组相比差异有统计学意义（ P ＜0.01）。而caspase8抑制剂作用不明显，与对照组相比差异没有统计学意义（ P ＞0.05）。 结论桑根酮C可通过激活caspase 3及caspase 9途径诱导PC3细胞的凋亡。