载脂蛋白A-I模拟肽D4F通过抑制caspase-12减轻氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞凋亡

目的：探讨载脂蛋白A-I（apolipoprotein A-I，ApoA-I）模拟肽IMF对氧化低密度脂蛋白（oxidized low—density lipoprotein，OX—LDL）诱导的巨噬细胞凋亡和内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）凋亡途径关键分子caspase-12的影响，并阐明其可能的分子机制。方法：体外培养RAW264．7巨噬细胞，给予12．5、25和50mg／LD4F、5mmol／LERS抑制剂4-苯丁酸（4一phenylbutyricacid，PBA）或5μmol／L二亚苯基碘翰（diphenyleneiodonium，DPI）预处理1h后，再加入100mg／LOX—LDL或4mrdLERS诱导剂衣霉素（tunicamycin，TM）继续培养24h。MTT法检测细胞活力；TUNEL法检测细胞凋亡情况；试剂盒测定细胞内丙二醛（malondialdehyde，MDA）和活性氧（reac—tiveoxygenspecies，ROS）水平，以及超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nic—otinamideadeninedinucleotidephosphate，NADPH）氧化酶活性；Westernblot法检测caspase-12的表达变化。结果：与ERS抑制剂PBA相似，IMF可抑制OX—LDL或TM所致的巨噬细胞活力降低和凋亡，且呈浓度依赖性（P〈0．05）。与氧化应激抑制剂DPI相似，D4F显著抑制OX-LDL诱导的氧化应激反应，表现为ROS和MDA生成减少（P〈0．01）、SOD活性增加以及NADPH氧化酶活性降低（P〈0．05）；与PBA和DPI相似，D4F可减轻OX-LDL诱导的巨噬细胞caspase-12活化，且呈浓度依赖性（P〈0．05）；另外，D4F还可抑制TM诱导的caspase-12活化（P〈0．05）。结论：IMF能够抑制OX-LDL诱导的巨噬细胞凋亡，其机制至少部分是通过减轻氧化应激继而抑制caspase-12活化实现的。