Adenilato ciclasa vi y filamina b, dos genes regulados por tgf-beta1 durante la angiogénesis in vitro

La angiogenesis o formacion de nuevos vasos a partir de la vasculatura pre-existente es estimulada pro factores como VEGF, FGF, TGF-beta1.. En el desarrollo de esta tesis doctoral se ha analizado el efecto que ejercen determinados genes sobre la angiogenesis mediada por TGF-beta1. Estos genes fueron identificados a partir de un screening realizado sobre celulas endoteliales en tres dimensiones en geles de colageno estimuladas o no con TGF-beta1. Por una parte se identifico el gen de Adenilato Ciclasa VI, que era reprimido por efecto de TGF-beta1 y por otro Filamina B, gen que era inducido. En el primer capitulo, se describe el efecto que AMPc ejerce sobre la angiogenesis mediada por TGF-beta1. AMPc ejercia un efecto negativo sobre la angiogeneiss, bloqueandola, lo que se traducia en un descenso de expresion de marcadores tipicos angiogenicos, como Ets-1 asi como en la transcripcion de genes tempranos de respuesta a TGF-beta1 como PAI-1. Por otra parte, AMPc no afectaba a la viabilidad de las celulas endoteliales, a la fosforilacion y traslocacion de las Smadas al nucleo o en su union al DNA. En el segundo capitulo de esta tesis doctoral, se analiza el posible papel de la Filamina B en la angiogenesis mediada tanto por TGF-beta1 como por VEGF. Este gen fue encontrado en el screenig como inducido por TGF-beta1. Una vez comprobado este hecho, se realizo una caracterizacion de la expresion de esta proteina en celulas y tejidos. Se constato que Filamina B se expresaba fundamentalmente en celulas endoteliales de vasos sanguineos. Filamina B inmunoprecipitaba tras la estimulacion con VEGF con el receptor 2 de VEGF, con Rac1 y con las integrinas alfavbeta3 y alfavbeta5. El descenso de expresion de Filamina B en celulas HUVE mediante siRNAs, conllevaba fallos en migracion, reorganizacion pseudotubular asi como fallos en la reorganizacion del citoesqueleto de actina. Este posible efecto sobre la angiogenesis podria venir