CORM-2减轻脂多糖诱导Caco-2细胞屏障损伤的作用

目的探讨外源性一氧化碳释放分子-2（CORM-2）减轻脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的Caco-2细胞屏障损伤的作用及机制。 方法用50μg/mL LPS刺激24 h，建立LPS诱导的Caco-2细胞单层损伤模型。将100 μmol/L CORM-2置于37℃、5%CO 2 的细胞培养箱中18 h，其中的CO已全部释放，即为无活性的CORM-2(iCORM-2)。实验设正常对照组、LPS损伤组、CORM-2预处理+LPS损伤组（用不同浓度CORM-2（10μmol、50μmol、100μmol）预处理1 h，PBS水洗三遍，然后50μg/mL LPS刺激24 h处理，再分为LC1 (10 μmol/L CORM-2预处理)、LC2 (50μmol/L CORM-2预处理)、LC3 (100 μmol/L CORM-2预处理)、LC4 (iCORM-2预处理) 4个亚组。采用流式细胞术检测各组Caco-2单层细胞的凋亡率。免疫荧光法检测Caco-2单层细胞及紧密连接蛋白（tight junction proteins，TJ）的分布及结构变化。ELISA法检测各组Caco-2细胞炎症因子(TNF-α、IL-1β与HMGB-1)的分泌水平。Western blotting法检测各组Caco-2细胞紧密连接蛋白(occludin、ZO-1、claudin-1与claudin-4)的表达变化。 结果LPS损伤后，与对照组相比，LPS损伤组Caco-2单层细胞的凋亡率明显升高（ P P P P P P 结论CORM-2呈浓度依赖性减轻LPS诱导的Caco-2细胞屏障结构损伤。其作用机制可能是通过抑制炎症细胞因子TNF-α、IL-1β与HMGB-1的产生和释放、降低Caco-2单层细胞的凋亡率、改善Caco-2细胞间TJ结构的变化和相关蛋白的表达与分布而实现。