Uso da citometria de fluxo para identificar marcadores biológicos e alvos terapêuticos la leishmaniose cutânea humana

Os receptores FCy constituem uma interface entre as respostas imunes celular e humoral, os quais parecem decisivos e antagonizam-se na patogenese da leishmaniose humana. Foi estudada entao a expressao destas moleculas como possiveis marcadores clinicos e biologicos na leishmaniose cutânea, como ja foi estabelecido em diversas doencas infecciosas e auto-imunes. Quantificou-se a expressao dos receptores Fcy (CD16, CD32 e CD64) no sangue periferico de pacientes com leishmaniose cutânea (LC) atraves de citometria de fluxo como tambem niveis de Fas (CD95) por ser estimulado por IFN-y como o CD64. Analisamos os resultados obtidos de pacientes de duas coortes da area endemica de Jequie/Jiquirica-BA, comparando com o grupo de controles sadios da area urbana de Salvador-BA, e correlacionando com a resposta imune ex vivo e apresentacao e evolucao clinica. Observamos que a expressao ex vivo de CD 16 em monocitos estava significativamente aumentada em pacientes com LC e correlacionava-se positivamente com tamanho de lesao e niveis de TGF-beta plasmatico. O CD32 estava aumentado em pacientes com LC porem nao estava correlacionado com a apresentacao clinica. A expressao ex vivo de Fas estava significativamente aumentada em monocitos, linfocitos e neutrofilos de pacientes com LC e correlacionou negativamente com tempo de cura. A expressao ex vivo de CD64 em monocitos de pacientes com leishmaniose cutânea estava aumentado signficativamente e correlacionou positivamente com resposta terapeutica ao antimonio pentavalente. Por outro lado, o CD64 mostrou-se um promissor alvo terapeutico num modelo experimental de inflamacao cutânea. Demonstramos que o tratamento in vitro com imunotoxinas dirigidas contra CD64 induziu apoptose e diminuiu significativamente a sobrevivencia de Leishmania amazonensis em macrofagos humanos infectados, projetando o seu possivel uso terapeutico. Em conclusao, validamos o uso de citometria de fluxo para identificar marcadores clinicos na leishmaniose cutânea, implicando na existencia de efeitos sistemicos da infeccao que podem ser avaliados no sangue periferico.