Tumores de células redondas y pequeñas de hueso y partes blandas con especial referencia al sarcoma de ewing/pnet y su diagnóstico diferencial. Un estudio de 841 casos

Se analizaron un total de 841 tumores de hueso y partes blandas fijados en formaldehido e incluidos en parafina con un diagnostico de tumores de celulas redondas y pequenas tipo Tumores de la Familia del sarcoma de Ewing (TFSE) procedentes de diferentes laboratorios de patologia Europeos. La mayoria de estas Instituciones pertenecian a los proyectos Europeos PROTHETS (Contrato 503036) y EUROBONET (Contrato 018814) para el estudio de los sarcomas de celulas redondas de huesos y partes blandas. El estudio fue realizado con el consentimiento del Comite Cientifico y Etica de todas las instituciones involucradas en la investigacion. El estudio histopatologico se realizo inicialmente mediante una observacion de las secciones o cortes completos de tejidos tenidos con HE tumores no pertenecientes a la familia del sarcoma de Ewing's (no-TFSE) y sarcomas/tumores indiferenciados sin otra posible especificacion estructural (SI). Los TFSE fueron sub-clasificados en los 3 subtipos histologicos principales (Convencional, PNET y atipicos).En el presente estudio se utilizaron las secciones completas para la tincion IHQ con los anticuerpos CD99, Fli1, HNK-1 y CAV-1 independientemente de que el diagnostico histologico fuera TFSE, no TFSE, o SI. El estudio con el resto de los anticuerpos se realizo en los cortes de TMAs, sin embargo, en los casos con un diagnostico diferente a TFSE, el estudio IHQ tambien se realizo en las secciones completas.Las secciones de parafina de los TMAs fueron procesadas utilizando las siguientes sondas para FISH EWSR!, FUS, SYT.En el presente estudio se ha podido realizar un analisis histopatologico, inmunohistoquimico y molecular molecular de un grupo de 841 sarcomas obtenidos mediante la cooperacion entre varias Instituciones internacionales gracias a los proyectos europeos (PROTHEST y EUROBONET) lo que ha permitido tipificar la mayor parte de esto tumores siendo fundamental para el diagnostico y tratamiento adecuado de los pacientes. El estudio inmunohistoquimico y molecular (FISH) utilizando micromatrices de tejidos reduce considerablemente los gastos de sondas y el tiempo. El empleo de las tecnicas de inmunohistoquimica, FISH y PCR en material incluido en parafina permite aplicar estas tecnicas en material reciente o archivado. Los anticuerpos CD99, CAV-1, Fli1 y HNK-1 se expresaron de manera estadisticamente significativa superior en los tumores de la familia del sarcoma de Ewing comparado con los demas tumores de la serie. CK,CK20, EMA, actina, desmina, miogenina, S100, CD45 y CD20 se expresaron de forma estadisticamente significativa superior en los tumores diferentes a los sarcomas de Ewing. Sin embargo un porcentaje no despreciable de sarcomas de Ewing confirmados molecularmente pueden expresar CK, CEA y EMA. En ninguno de los casos con diagnostico molecular confirmado de sarcoma de Ewing se encontro expresion de desmina, miogenina, CD45, CD20 ni CK20. No se detectaron diferencias estadisticamente significativas en la expresion de CD99, CAV-1, Fli-1, HNK-1, marcadores epiteliales, neurales y otros marcadores cuando comparamos la expresion IHQ de estos anticuerpos en los diferentes subtipos histologicos de tumores de la familia del sarcoma de Ewing. Sin embargo, los Ewing atipicos expresaban en mayor porcentajelos marcadores epiteliales CK; CEA e incluso EMA no reportado hasta el momento actual. No hubo diferencias estadisticamente significativas en la expresion IHQ de la mayoria de los anticuerpos empleados en el estudio cuando comparamos los tumores pertenecientes al grupo 1 y al grupo 2. Estos hallazgos sugieren que cuando las caracteristicas morfologicas son altamente compatibles con sarcoma de Ewing un resultado molecular positivo es suficiente para confirmar el diagnostico. Considerando los resultados obtenidos en el presente estudio sugerimos que ante un tumor de celulas redondas y azules que sea CD99-, CAV-1- ,FISH y/o RT-PCR negativo o no informativo para translocacion EWS/ETS o FUS queda excluida la posibilidad de un tumor de la familia del sarcoma de Ewing. De manera similar cuando las tecnicas de FISH/RT-PCR muestren resultados tipicos de otra entidad especifica diferente al sarcoma de Ewing aunque el CD99 y la CAV1 sean positivas tambien excluye el diagnostico de TFSE.