异硫氰酸荧光素-牛血清蛋白-Pb^2＋“开关”型荧光探针测定尿液中胰蛋白酶

本文研究了＂开关＂型异硫氰酸荧光素（FITC）-牛血清蛋白（BSA）-Pb^2＋荧光探针测定胰蛋白酶。实验发现,FITC-BSA探针在Pb^2＋和十二烷基苯磺酸钠（DBS）存在下,可以发出较强的荧光,此时体系处于＂打开＂状态。当在pH=7.8的Tris-HCl缓冲溶液中加入胰蛋白酶后,FITC-BSA-Pb^2＋发生荧光猝灭,探针被＂关闭＂,并且胰蛋白酶的浓度在一定范围内与探针的荧光猝灭程度呈良好的线性关系。实验表明,胰蛋白酶浓度与体系荧光猝灭程度在2.4~24μg/mL间呈良好线性关系,相关系数r=0.9972,方法检出限（3σ/k）为0.80μg/mL。该方法应用于尿液中胰蛋白酶的检测,其相对标准偏差（RSD）≤3.0%,回收率范围为102.1%~106.0%。