Estudio de componentes celulares del Fluido Ascítico de pacientes con carcinoma de ovario

Durante el proceso metastasico del cancer de ovario epitelial (COE), las celulas tumorales se desprenden de la superficie del tumor primario en el ovario y son movidas por el fluido peritoneal a la cavidad celomica. Como consecuencia de la diseminacion peritoneal se produce la acumulacion anormal de liquido ascitico. El liquido ascitico o Fluido Ascitico (FA) es reservorio de factores de crecimiento y distintos tipos celulares que podrian favorecer el desarrollo metastasico. Dado su potencial diagnostico/prognosis, se planteo como objetivo, analizar el FA de pacientes con COE e identificar distintos tipos celulares que pudieran estar relacionados con el desarrollo de la malignidad. Los FA fueron obtenidos de 3 cirugias programadas en el Hospital Nacional de Clinicas (REPIS3167). Para el analisis las poblaciones celulares de los FA los FA fueron inmunomarcadas con Falloidina-TRITC (actina), alpha-tubulina (microtubulos) y DAPI (nucleo). Se tomaron fotografias en un microscopio invertido y las imagenes se analizaron con el programa Fiji. Paralelamente, el FA de una paciente fue procesado para citometria de flujo usando como marcadores CD4, CD8 y CD45, para identificar subpoblaciones de celulas leucocitarias. Posteriormente se usaron monocapas de celulas de la linea celular de COE SKOV3 para el analisis mediante inmunofluorescencia del efecto del FA sobre la morfologia celular. Se observaron agregados celulares suspendidos en el fluido tratandose probablemente de esferas tumorales en suspension. Se observaron eritrocitos apilados, lo que se conoce como fenomeno de Roleaux. Ademas, fue observada una poblacion de celulas de menor tamano, de aprox 10 mm de diametro correspondiente a una poblacion de celulas hematopoyeticas. El analisis de citometria de flujo revelo que el 13% corresponde a celulas Natural Killer, 36% CD4+, 14% CD8+, 10% Monocitos/macrofagos, 23% probablemente celulas B y 3% granulocitos. Por otro lado, el FA proveniente de un tumor mucinoso ocasiono severos defectos sobre la morfologia de celulas mitoticas cuando celulas SKOV3 fueron cultivadas con el FA, sugiriendo que los componentes mucinosos tienen un efecto sobre la morfologia celular. Nosotros proponemos que el FA podria ser valorado como potencial herramienta diagnostica y podria ser usado para evaluar una estrategia terapeutica apropiada para pacientes con COE.