miR-143通过抑制AF9调控SKM-1细胞增殖和凋亡

2018 
目的探讨miR-143在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)中的表达情况及AF9对人骨髓增生异常综合征细胞株SKM-1增殖和凋亡的影响。 方法利用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测收集的33位MDS/AML患者以及11位健康人(健康对照)的骨髓标本中miR-143的表达;细胞实验分为过表达组(SKM-1细胞感染含LV-hsa-miR-143的慢病毒载体)、低表达组(SKM-1细胞感染含LV-hsa-miR-143-inhibitors的慢病毒载体)和阴性对照组(SKM-1细胞感染含空病毒LV-control的慢病毒载体),分别采用CCK-8法、流式细胞仪检测各组SKM-1细胞增殖、周期和凋亡情况;双荧光素酶报告基因检测miR-143对下游靶基因AF9在转录水平的影响;Western blot测定miR-143对下游靶基因AF9蛋白表达水平的影响。 结果与健康对照比较,MDS患者的miR-143相对表达水平明显降低( P P P 0 /G 1 期细胞比例为(57.92±3.58)%,明显高于阴性对照组( P 0 /G 1 期细胞比例为(29.73±2.44)%,明显低于阴性对照组( P P P P 结论miR-143在MDS患者中的相对表达水平明显减低;过表达miR-143后骨髓增生异常综合征SKM-1细胞增殖活性降低、G 0 /G 1 期细胞阻滞增多、凋亡率增加;同时miR-143能够负性调节其靶基因AF9。
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