Effets de l’environnement alvéolaire sur la polarisation des macrophages au cours du SDRA : conséquences sur la réparation alvéolaire

Introduction Les fonctions des macrophages dependent de leur phenotype qui fluctue entre un etat pro-inflammatoire (M1) ou anti-inflammatoire (M2a et M2c) apres polarisation induite par l’environnement tissulaire. Les macrophages ont ete impliques dans la reparation tissulaire et le remodelage. Cependant, la participation des macrophages dans la reparation alveolaire reste peu connue chez l’homme en particulier au cours du SDRA. Nos objectifs etaient in vitro : – d’etudier l’effet de l’environnement alveolaire de patients avec ou sans criteres de SDRA sur la polarisation de macrophages; – d’evaluer les consequences de cette polarisation sur la reparation epitheliale alveolaire. Materiel et methodes Etude prospective bicentrique non interventionnelle ayant obtenu l’avis favorable du Comite d’evaluation de l’ethique des projets de recherche biomedicale (CEERB) du GHU Nord (n o  12-087). Des monocytes humains issus de temoins sains ont ete cultives et differencies in vitro en macrophages en presence de rhGM-CSF et de rhM-CSF pendant 3 jours. Les macrophages etaient ensuite polarises apres 3 jours supplementaires de culture en presence soit de cytokines induisant les phenotypes : M1 (rh-IFNγ), M2a (rh-IL-4) et M2c (rh-IL-10), soit de Liquide Broncho Alveolaire (LBA) (25 % vol/vol) issus de patients a la phase precoce de SDRA ( n  = 12), de temoins ventiles (TV, n  = 10) ou de temoins non ventiles (TNV, n  = 4). La caracterisation de la polarisation des macrophages a ete realisee par qPCR a l’aide des marqueurs CD80 (M1), CD200R (M2a) et CD163 (M2c). L’effet des surnageants de macrophages (SM) sur la reparation epitheliale a ete determine dans un modele de plaie epitheliale calibree (insert) utilisant une monocouche de cellules pulmonaires A549. L’implication de l’IL-1β dans cet effet a ete specifiquement evaluee a l’aide d’un anticorps monoclonal anti IL-1β. Resultats Le LBA de patients en SDRA favorisait la polarisation M1, alors que le LBA de TV induisait une polarisation M2c. Le LBA des TNV n’avait pas d’effet specifique sur la polarisation. Les SM recueillis apres polarisation M1 par rh-IFNγ ou par le LBA de SDRA augmentaient la vitesse de fermeture de la plaie, respectivement de 39 % ( p  = 0,01) et 36 % ( p p  = 0,004) la fermeture induite par les SM recueillis apres polarisation M1 via le LBA de patients en SDRA ( n  = 7). Discussion L’environnement alveolaire au cours du SDRA induit une polarisation des macrophages vers un profil M1. Nous montrons pour la premiere fois chez l’homme que la polarisation M1 influence la reparation alveolaire en induisant la migration epitheliale, a l’inverse de la polarisation M2c. L’IL-1β secretee par les macrophages M1 est un mediateur important implique dans cet effet, mais d’autres mediateurs sont susceptibles d’etre impliques et restent a determiner.