Rôle des chaperons d’histones dans la réplication et la réparation de l’ADN

La chromatine chez les eucaryotes, porte des informations genetiques et epigenetiques. Les mecanismes garantissant le maintien de ces informations lors de la division cellulaire ou la reparation de l’ADN sont encore mal connus et ils constituent l’enjeu principal du projet de these. Plus particulierement, l’objectif du projet de these est de chercher a comprendre comment les chaperons d’histones coordonnent leur action avec des partenaires associes a la fourche de replication pour conserver les marques epigenetiques portees par les histones parentales et les reporter sur les histones nouvellement synthetisees. Cette these decrit precisement comment ASF1 (Anti Silencing Function 1) coopere avec le complexe CAF-1 (Chromatin Assembly Factor 1) et la sous-unite de l’helicase replicative MCM2 (Mini Chromosome Maintenance 2), pour la prise en charge des H3-H4 dans la replication et la reparation de l’ADN.La these s’interesse egalement a la regulation de l’activite de ces chaperons d’histones par des kinases activees suite a des stress replicatifs ou des dommages de l’ADN. En particulier nous avons cherche a mieux comprendre comment l’ajout de groupements phosphate sur ASF1 par une enzyme appelee TLK (Tousled Like Kinase) module son activite au cours du cycle cellulaire et en reponse aux dommages de l’ADN. La caracterisation de l'importance des sites phosphoryles sur les proprietes de liaison du chaperon, permet de mieux comprendre le role joue par different forme d’ASF1 dans l’assemblage des histones sur l’ADN et le maintien des informations epigenetiques. Le travail de these contient d’analyses biochimiques et structurales par une combinaison de techniques (SEC-MALS, AUC, ITC, RMN, cristallographie des rayons X) et d’analyses fonctionnelles sur des modeles cellulaires.